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feulgen 富尔根染色实验检测
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feulgen 富尔根染色实验检测
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DC0009
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feulgen 富尔根染色实验检测

服务介绍:富尔根染色是一种用于检测细胞核DNA的经典组织化学染色方法,由Robert Feulgen和Heinrich Rossenbeck于1924年开发。该染色法特异性强,主要用于DNA的定位和定量分析。

染色原理:Feulgen染色法是一种用于显示和定量测定DNA的细胞学实验方法。该方法利用DNA在稀盐酸水解后产生的醛基与Schiff试剂(席夫试剂)反应,形成紫红色的化合物,从而显示出DNA的分布。

实验步骤

1脱蜡和水化:将石蜡切片置于二甲苯中脱蜡,2次,每次5-10分钟。用梯度乙醇(100%95%80%70%)逐步水化,每步2-3分钟。最后用蒸馏水冲洗切片。

2水解:将切片浸入预热至60°C1N HCl中,水解5-10分钟(时间需优化,通常为8分钟)。

水解后,用蒸馏水冲洗切片。

3希夫试剂染色:

将切片浸入希夫试剂中,室温避光染色30-60分钟。染色后,用亚硫酸水溶液漂洗切片2-3次,每次2分钟,以去除未结合的希夫试剂。

4水洗:用流动自来水冲洗切片5-10分钟,去除残留的亚硫酸水溶液。

5脱水:用梯度乙醇(70%80%95%100%)逐步脱水,每步2-3分钟。

6透明:将切片浸入二甲苯中透明,2次,每次5分钟。

7封片:用中性树胶封片,盖上盖玻片。

结果判读:

DNA呈紫红色,细胞质和其他成分呈淡绿色

注意事项:

1水解时间:水解时间需严格控制,过长或过短都会影响染色效果。

2希夫试剂:希夫试剂需新鲜配制或妥善保存,避免失效。

3避光:染色步骤需避光进行,防止希夫试剂分解。

4对照设置:建议设置阳性和阴性对照,确保染色特异性。 

仅供科研实验用,不做其他用途!

 

 

 

  

TEL: 4008-013-053  点击拨打热线