甘油三酯(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 双试剂微板法)的计算公式

点击次数:251次     发布时间:2023/12/25 9:52:18

 甘油三酯(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 双试剂微板法)的计算公式

产品简介:

甘油三酯(Triglyceride,TG)又称三酰甘油,是 3 分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是人体内含量最多的脂类,大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量,同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成,用酶学方法测定TG是生化检测中的常用方法,其特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于半自动生化分析仪。

甘油三酯(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 双试剂微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等,其原理是甘油三酯被脂蛋白酯酶(LPL)水解为甘油和脂肪酸,甘油经甘油激酶(GK)和三磷酸腺苷(ATP)磷酸化为 3-磷酸甘油(G-3-P),后被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并产生过氧化氢,再经过氧化物酶(POD)、4-氨基安替比林(4-AAP)与酚(三者合称 PAP)反应,生成红色苯醌亚胺(Trinder 反应),苯醌亚胺的最大吸收在 510nm波长处,吸光度与样本中甘油三酯含量呈正比,可通过酶标仪在 500~520nm 处进行比色测定。本试剂盒用于人或动物的血清、细胞、组织等样本中的甘油三酯含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 

操作步骤(仅供参考)

1、样本处理:

①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。

②细胞样本:

a、取适量的细胞(一般推荐>106 以上),1000g 离心 10min,弃上清,留取沉淀。

b、用 PBS 或生理盐水清洗 1~2 次,1000g 离心 10min,弃上清,留取沉淀。

c、加入 200~300μl 的 PBS 或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率 300W, 每次 3~5s,间隔 30s,重复 3~5 次。亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心;亦可 1~2% Triton X-100 冰浴 30~60min,制备好的裂解液不可离心。

③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或 PBS(ml)=1:9 的比例,加入生理盐水或 PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆,2500~3000g 离心 10min,取上清待用。

2、配制 GPO-PAP 工作液:将缓冲液和酶试剂按 4:1 体积比混合均匀即成。

计算公式:

血清、血浆等液体样本(空白调零)

TG(mmol/L)=(待测管吸光度/标准管吸光度)×1.7mmol/L

细胞、组织等样本(空白调零)

TG(mmol/g)=(待测管吸光度/标准管吸光度)×1.7mmol/L÷待测样本蛋白浓度(mg/ml)

参考区间:

健康成年人理想范围:<1.7mmol/L(<150mg/dl)

边缘升高:<1.7~2.25mmol/L(150~199mg/dl)

升高:<2.26~5.64mmol/L(200~499mg/dl)

很高:565mmol/L(500mg/dl)

注意事项:

1、 上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。

2、 本法可直接用于检测脑脊液中的 TG 含量,但不能直接检测尿液中的 TG 含量,因为未经处理的尿液中含有还原性物质,影响过氧化物酶反应。

3、 待测样本如不能及时测定,应置于 2~8℃保存,3 天内稳定。

4、 本法线性范围可达 9.0mmol/L,如果样本 TG 浓度过高,结果可能呈假性降低,应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

5、 工作试剂应防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。

6、 试剂易受空气氧化而变红,需做空白测定。

7、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6 个月有效。4℃运输,-20℃保存。

 甘油三酯(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 双试剂微板法)的计算公式

 

 

TEL: 4008-013-053  点击拨打热线