单胺氧化酶(MAO)测定试剂盒的操作过程
(紫外比色法 50 管/48 样)
一、测定意义:
单胺氧化酶(Monoamine oxidase,MAO)在体内分布
很广,以肝、肾、脑组织中含量最多。组织中 MAO 主要
存在于线粒体上,和膜紧密结合;少量存在于细胞质可
溶成份中,血清中 MAO 是水溶性,与线粒体上的 MAO
不同,而和结缔组织中的 MAO 相似。MAO 能促进结缔
组织的成熟,在胶原形成过程中,MAO 参与胶原成熟最
后阶段的架桥形成,使胶原和弹性硬蛋白结合。
二、测定原理:
以苄胺为底物,在 MAO 作用下,生成苄醛,以环已
烷提取,在 242nm 测定吸光度,可测算出酶的活力。
三、试剂的组成与配制:
试剂一:液体 20mL×1 瓶,2~8℃避光保存 3 个月。
试剂二:液体 100mL×2 瓶,2~8℃保存 6 个月。
试剂三:液体 20mL×1 瓶,2~8℃保存(对皮肤有刺激)
3 个月。
试剂四:液体 100mL×2 瓶,2~8℃避光保存 3 个月。
四、操作过程:
1、样本前处理:
①、血清(浆):可直接进行测定。
②、组织:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9 的
比例,加入 9 倍体积的生理盐水,冰水浴条件下
机械匀浆,制成 10%的匀浆, 2500 转/分,离心
10 分钟,取上清待测。(取部分上清液测总蛋
白浓度,总蛋白定量试剂盒本所有售)
2、操作表:
* 比色皿在用双蒸水冲洗干净后,还必须用无水乙醇冲
洗,晾干后,备用。
[注]:连续抽提是指在旋涡混匀器上持续混匀,不间断;
操作过程最好使用玻璃试管操作,有些耐有机试剂
腐蚀的离心管也可以;由于上清液为有机试剂易挥
发,离心过后,需尽快完成比色。
单胺氧化酶(MAO)测定试剂盒的操作过程