半胱氨酸(Cys)测试盒的操作过程

( Cysteime Kit 法)

 

一、测定原理

Cys 还原磷钨酸生成钨蓝，在600nm 处有吸收峰:通过600nm 吸光度，计算Cys 含量。

 

二、仪器设备及需自备试剂

可见光分光光度计、低温离心机、微量移液枪、磷酸和蒸溜水

 

三、试剂组成:(50T/48 样)

试剂一:液体x1 瓶，4℃保存。

试剂二:液体x1 瓶，4℃保存

试剂三:粉剂x1 瓶,4℃保存。提前一天向试剂三中加5ml蒸留水充分溶解,再加磷酸1.25ml,

混匀后盖紧(防止水分散失) 沸水浴2h; 冷却后加20mI蒸馏水，4℃保存2周

标准品:1umol/ml 标准液x1 瓶，4℃保存。

 

四、操作步骤

1.半胱氨酸提取：

样本提取详见试剂盒内说明书。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用本所的

A045-2总蛋白定量测试盒（考马斯亮蓝法）或者A045-3、A045-4总蛋白定量测试盒 (BCA

法)进行蛋白浓度的测定。

2. 操作表

 半胱氨酸(Cys)测试盒的操作过程