信帆生物开展elisa试剂盒操作的知识培训
ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。
Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
试剂盒的使用注意事项:
1、样本要求:样本应清澈透明,悬浮物应离心去除;避免使用溶血、高血脂样本。样本收集后若不立即检测,冻存于-80°冰箱,避免反复冻融。样本每次检测使用前要混匀,用完后将相应版布局及样本编号记录在实验本上,样本及时放入冰箱。
2、实验前准备
1.对应订单找到相应的样本和试剂盒。
2.核对样本个数、种类、编号、样本量是否足够,核对试剂盒种属、个数、日期,确定试剂盒是否够用、有没有过期。
3.注意订单上备注栏客户的要求,是否做复孔等。(以上三点有问题在实验前及时与销售沟通)
注:安排好时间,注意实验节奏,做好相应的记录帮助记忆,安排要有条理。
操作要求
1.试剂盒在使用前要平衡到室温,底物在使用前应保存在暗处,避光;
2.正式实验前需做预实验确定合适的稀释倍数,做预实验前注意说明书上建议稀释倍数。预实验双抗夹心法选取标曲最高两个点,竞争法选取标曲最高点与最低点,选取两个样本根据建议稀释倍数稀释三个梯度;
3.孵育温度与时间准确;洗板非常重要,每步洗板都一定要洗干净;
4.标准品在用前稀释,且稀释的每一步都要混匀,注意标曲的起始浓度是否与重溶浓度一致;
5.点样量一定要精确,完全打尽移液枪内样本与试剂,快速、等量的将试剂分配到各个微孔中;
6.抗体和HRP稀释倍数要严格按照说明书规定稀释;
7.各步骤之间,需用封板贴密封反应板避免蒸发;实验一旦开始,应连续完成所有的实验步骤,切勿中断。