祝贺湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院订购我司产品发表文章成功

点击次数:304次     发布时间:2023/5/24 15:54:51

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标题《绞股蓝提取物通过调控lncRNA PICSAR对IL-1β诱导软骨细胞损伤的保护作用及机制研究》

摘要:目的探讨绞股蓝提取物对白介素1β(IL-1β)诱导软骨细胞损伤的作用及分子机制。方法 2020年10月—2021年4月于湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院进行实验,将关节软骨细胞随机分为对照(NC)组、IL-1β组及绞股蓝提取物低、中、高剂量组、IL-1β+si-con组、IL-1β+si-lncRNA PICSAR组、pcDNA-con+高剂量组、pcDNA-lncRNA PICSAR+高剂量组,分别对其进行干预水平;用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹(Western-blot)法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleave-caspase-3)蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA PICSAR表达水平。

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细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检测。细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体。凋亡前期,染色质皱缩,细胞密度增加;凋亡后期,细胞产生凋亡小体,细胞的光散射均会发生变化。

 

细胞周期与凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)采用了经典的碘化丙啶染色(Propidium staining)方法对细胞周期与凋亡进行检测分析。利用碘化丙啶能够嵌入双链DNA中,并使其产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比的特性;结合细胞不同周期中,DNA含量的规则变化,可以区分细胞处于的周期和状态。本试剂盒可用于组织细胞、贴壁或悬浮细胞的细胞周期与凋亡检测(如用于组织的细胞周期与凋亡检测,则须把组织消化成单细胞状态,才可进行检测)。

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