浙江中医药大学订购我司elisa试剂盒发表文献成功
标题《活血康脑颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用》
摘要:目的探究活血康脑颗粒(黄芪、巴戟天、葛根等)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,SD大鼠随机分为假手术组,模型组,阳性对照组,活血康脑颗粒低、中、高剂量组。测试神经功能评分,TTC染色计算脑梗死体积,酶联免疫吸附(ELISA)法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、6-酮-前列腺素(6-keto-PGFlα)、血栓素B2(TXB2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达水平。为了观察活血康脑颗粒对血小板聚集功能的影响,全自动血凝分析仪分析凝血时间,ELISA法测定血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和抑制物(PAI)活性,全自动生化分析仪检测血液流变学指标。
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操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。